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IDENTIFICACIÓN MICROBIOLÓGICA La identificación se inicia con la observación de la morfología de las colonias y practicando un examen microscópico a partir del cultivo mediante las tinción de Gram y la de Kinyoun modificada, que pondrá de manifiesto la ácido-alcohol resistencia parcial de algunas cepas. La diferenciación de los principales géneros relacionados con Nocardia puede hacerse basándose en las características y pruebas de la tabla 1. Para la identificación de especie se emplean métodos fenotípicos basados en los estudios bioquímicos y de sensibilidad antibiótica, que vendrían a simplificarse en el esquema propuesto por Kiska et al. (tabla 2). También pueden realizarse las pruebas clásicas de Gordon et al., complementadas con las descritas por Wallace et al. (tabla 3). No obstante, las pruebas fenotípicas resultan tediosas y lentas y, además, la descripción y reclasificación de especies es constante. La cromatografía de gases y el análisis por HPLC, arrojan perfiles difíciles de interpretar, aunque se han empleado en la identificación de las especies. Por el contrario, las técnicas de biología molecular, rápidas y relativamente sencillas, han demostrado una capacidad igual o superior para identificar las distintas especies del género Nocardia mediante el estudio del polimorfismo de restricción. Por ejemplo, la amplificación y restricción (PRA) de una secuencia de 439 pb del gen de una proteína de 65 kD, descrita por Steingrube et al., o el PRA de una secuencia genómica de la 16S ARNr descrita por Conville et al. Estos procedimientos, no obstante, tampoco están exentos de limitaciones, ya que la extracción o la amplificación puede resultar difícil en algunas cepas, o algunos perfiles pueden no corresponder a ninguno de los descritos. Por último, la secuenciación genómica de la 16S ARNr y su comparación en un banco genético es un arma extremadamente útil para la identificación definitiva, aunque no está al alcance de todos los laboratorios.